Модные техники окрашивания волос 2018-2019

В этом статье мы расскажем самых популярных техниках окрашивания.

Однотонное окрашивание теряет свою актуальность. Большинство техник отличается сложным исполнением. Дома такое окрашивание выполниться не удасться. Нужен хороший салон красоты!

В 2019 наиболее популярными стали следушие техники колористики:

• Шатуш. Данная техника похожа на омбре, только более мягкое. Цвет мягко перетекает от более темного к более светлому. Мастер использует несколько оттенков, чтобы переход выглядел максимально естественно. Такое окрашивание призвано имитировать эффект выгоревших на солнце кончиков волос.

• Балаяж. Эта техника предполагает окрашивание мелких прядей по всей длине, либо от середины головы. Цвет растягивается снизу вверх. Мастер использует несколько оттенков, создавая естесственный блики, переливы и цветовые акценты. Окрашивается только верхнии пряди, так что это окрашивание очень щадящее и подходит обладательницам тонких и поврежденных волос.

  Кроме того трехмерный цвет, получаемый в результате применения данной техники, придает волосам дополнительный объем. Особенно красиво балаяж смотрится на леких небрежных волнах.

• Омбре и сомбре. Данный техники очень похожи по методу исполнения и предполагают переход от темных корней к более светлым или ярким кончикам. Омбре предполагает контрасные цвета, сомбре — близкие. Собре сейчас более актуально.

• Фламбояж. Для выполнения этой техники мастер использует бумажную клеящую ленту, на которую крепится маленькая прядка волос для окрашивания в несколько цветовых оттенков с плавными переходами. В результате Вы получите максимально естественный оттенок с легкими переливами и мягкими бликами.

• Брондирование. Эта техника предполагает многоступенчатое окрашивание с использованием 4-6 разных оттенков.

• Пиксельное окрашивание. Эта техника стала новинкой 2018 и завоевала любовь самых смелых модниц. Техника сложная, требует опытного мастера и идеально гладких волос. Даже обладательницам прямых волос следует выполнить кератиновое выпрямление перед окрашиванием, чтобы волосы не пушились. Пиксельное окрашивание позволяет создать на шевелюре различные контрастные узоры.

• Трафаретное окрашивание. Эта техника схожа пиксельным окрашиванием. Для получения рисунка используются трафареты различных форм.

• Контуринг — техника, позволяющая скорректировать форму лица, подчеркнуть достоинства и скрыть недостатки внешности. С помощью высветления отдельных прядей достигается эффект скульптурирования формы прически.

Для коротких волос

На коротких волосах прекрасно смотрится окрашивание в технике фламбояж. Оно не требует частой коррекции, позволяет визуально увеличить объем шевелюры. Кроме того такое окрашивание подчеркнет оригинальность Вашей стрижки.

На стрижках каре и бобзамечательно смотрится брондирование.

Самым смелым прийдется по вкусу оригинальное пиксельное или трафаретное окрашивание.

Для средних и длинных волос

На средних и длинных волосах прекрасно смотрятся окрашивания в техниках шатуш, балаяж и сомбре. Модным цветом волос в 2019 году на среднюю длину второй сезон подряд остается клубничный блонд теплых и холодных оттенков.

100 лучших идей и новинок на фото

Реклама

Хотите перемен в своем образе? Тогда начните с прически. Не обязательно кардинально менять стрижку и длину волос, достаточно освежить оттенок локонов, преобразив себя с новыми трендами 2018.

Предлагаем вашему вниманию самые модные техники окрашивания волос, которые будут на пике популярности в 2018 году. Воспользовавшись ими, вы без сомнения будете выглядеть роскошно и привлекательно.

Актуальные тренды в окрашивании волос 2018

Однотонное окрашивание волос давно перестало удовлетворять модниц, желающих выразить с помощью цвета локонов свой характер и предпочтения.

В моде градиентное и трафаретное окрашивание, колоризация отдельных прядей и что самое важное изменилась цветовая гамма красок для волос.

Наряду с привычными сочетаниями темный-светлый, все чаще модницы останавливают свой выбор на ярких сочных оттенках, которые поражают своей экстравагантностью.

Сплэшлайтс: Тренд 2018

Технология окрашивания сплэшлайтс достаточно новая, но уже полюбилась модницами всех возрастов.

Splashlight позволяет создать на волосах подобие солнечного перелива, который коснулся волос и освещает их ровной полоской.

Для создания солнечного «поцелуя», так еще называют технологию Splashlight, используется желтая цветовая палитра. Чаще всего это медный, золотой, бронзовый цвет, песочный или соломенный.

Создать солнечный блик на волосах самостоятельно вряд ли получится, поэтому для получения эффекта дневного света на шевелюре лучше обратиться к мастеру.

Модное 3-D окрашивание 2018

Брондирование настолько популярно среди девушек, что применяется ими на протяжении уже нескольких лет. Для гармоничного и действительно красивого брондирования необходимо взять сразу три оттенка, именно тогда результат будет выглядеть естественно.

Основная задача 3-D брондирования – создание природного натурального объема, при котором шевелюра будет выглядеть пышно и объемно.

Преимущество брондирования в том, что эта техника подходит обладательницам абсолютно любого цвета волос, как темноволосым, так и светловолосым девушкам. Но на последних она выглядит намного эффектнее.

Плавный градиент: Омбре-сомре 2018

Омбре сложно назвать новинкой. Градиентное окрашивание – классика современного парикмахерского искусства, которое надолго останется в предпочтениях модниц.

Техника омбре представляет собой сочетание двух и более тонов одного и того же цвета, либо совершенно разных по тону цветов.

Изюминка техники омбре – переход от одного цвета к другому. Он должен быть максимально плавным и лаконичным. Даже если при окрашивании используются разные контрастные цвета, то переход между ними не бросается в глаза.

Омбре – универсальная техника, которая подойдет для волос разной длины от ультра-коротких до длинных. При этом не ограничен возраст использования этой техники, меняются только цвета. Для дам постарше – это светлые спокойные оттенки, для молоденьких девушек можно использовать совершенно иные яркие бросающиеся в глаза цвета.

Техника омбре прекрасно выглядит с различными укладками – прямыми волосами, волнистыми локонами и даже с завитыми волосами.

Переход между цветами не теряется даже если собрать волосы в хвост, косичку или пучок – все это смотрится привлекательно и красиво.

Омбре – та техника, где можно дать волю фантазии и выбрать любые цвета для окрашивания, порой даже те, которые на первый взгляд не сочетаются.

В тренде холодные цвета – медный, пшеничный, пастельно-розовый, черный самых различный оттенков.

Мелирование: Привычная классика с новыми гранями

Техника мелирования – первые попытки мастеров разнообразить образ девушки с помощью выделения отдельных прядей другим цветом.

К тому же мелирование можно сделать в домашних условиях, что быстро подхватили модницы всех возрастов.

Мелирование предполагает использование комбинации нескольких светлых оттенков, незначительно отличающихся друг от друга.

В новом 2018 году в тренде натуральные цвета с использование естественной палитры, которые гармонично выглядят на коротких, средних и длинных волосах. Подобное сочетание позволяет создать эффект чуть-чуть выгоревших прядей.

Наиболее актуальны для мелирования платиновые и приглушенные красные оттенки.

Техника балаяж: Модная альтернатива омбре

Балаяж – одна из самых модных новинок 2018. Для окрашивания используются различные оттенки одного и того же цвета, которые создают естественный эффект выгоревших на солнце волос.

Переход от одного цвета к другому аналогичен технике омбре. В балаяже используется плавный градиентный переход с захватом отдельных прядей на голове.

Шатуш: модная тенденция 2018

Впервые взглянув на технику окрашивания шатуш можно с легкостью ступать ее с омбре и балаяж. Действительно все эти техники имеют что-то общее, но шатуш лучше выглядит на темных волосах.

Эффект выгоревших прядей в технике шатуш также плавно переходит от одного цвета к другому, но в отличие от омбре, окрашенные локоны расположены хаотично, поэтому эффект четкого градиентного перехода отсутствует.

Техника шатуш великолепно выглядит на средних и длинных волосах, на которых наиболее выгодно открывается игра красок.

В тренде темные выразительные сочетание оттенков – кофе с молоком, темной и бежевый, янтарный, медовый, лесной орех, тициан. Именно эти тона прекрасно выглядят на темных волосах, для обладательниц которых собственно и предназначена техника шатуш.

Трафарет на волосах: Актуальный тренд для ярких личностей

Хотите выглядеть стильно и необычно, то техника трафарет именно то, что вам нужно.

Техника трафарет позволяет нанести на волосы разнообразные рисунки и принты, которые выглядят смело и экстравагантно.

Наиболее популярны принты с геометрическими и животными тематиками, элементами флоры. Для тех, кто жаждет большей креативности, может создать трафарет по собственному эскизу.

Чаще всего трафаретное окрашивание привлекает молодых неформальных девушек. Сложно себе представить деловую леди с выразительными принтами на голове.

В тренде леопардовые трафареты, витиеватые волны, растительные узоры – крупные цветы, листья, восточные узоры, кружево и другие.

Яркие цвета 2018: Модное окрашивание color melting

Модные техники окрашивания волос не обходятся без ярких радужных прядей. Невероятное сочетание перламутровых цветов, драгоценных опалов наполняет шевелюру великолепным сиянием.

Эффект таяния цвета создает яркий и красивый результат окрашивания, позволяя забыть о сложных укладках.

Само окрашивание color melting уже позволяет говорить о законченной и гармоничной прическе.

Натуральность и естественность по-прежнему в тренде 2018. Даже если используются яркие тона, то они максимально приближены к натуральным.

В 2018 модны нескучные сложные техники окрашивания, призванные внести нотку разнообразия в вашу природную красоту.

Дифференциальные методы окрашивания – микробиология: лабораторный опыт

Просмотр бактериальных клеток

Микроскоп является очень важным инструментом в микробиологии, но существуют ограничения, когда дело доходит до его использования для наблюдения за клетками вообще и бактериальными клетками в частности. Двумя наиболее важными проблемами являются разрешение и контрастность. Разрешение — это ограничение, с которым мы ничего не можем поделать, поскольку большинство бактериальных клеток уже приближаются к пределу разрешения большинства световых микроскопов. Контраст, однако, можно улучшить, используя оптические системы другого типа, такие как фазово-контрастный или дифференциально-интерференционно-контрастный микроскоп, или окрашивая клетки (или фон) хромогенным красителем, который не только добавляет контраста, но и дает им тоже цвет.

В микробиологии используется множество различных красителей и процедур окрашивания. Некоторые из них включают одно окрашивание и всего несколько шагов, в то время как другие используют несколько окрашиваний и более сложную процедуру. Прежде чем приступить к процедуре окрашивания, клетки необходимо смонтировать (размазать) и зафиксировать на предметном стекле.

Бактериальный мазок — это просто небольшое количество культуры, нанесенное очень тонкой пленкой на поверхность предметного стекла. Чтобы предотвратить вымывание бактерий на этапах окрашивания, мазок можно химически или физически «фиксировать» на поверхности предметного стекла. Термофиксация — это простой и эффективный метод, который достигается путем кратковременного пропускания предметного стекла через пламя горелки Бунзена, в результате чего биологический материал более или менее постоянно прикрепляется к поверхности стекла.

Мазки, зафиксированные нагреванием, готовы к окрашиванию. При простом окрашивании к мазку добавляются красители, которые либо притягиваются за счет заряда (катионный краситель, такой как метиленовый синий или кристаллический фиолетовый), либо отталкиваются за счет заряда (анионный краситель, такой как эозин или тушь).

Катионные красители связывают бактериальные клетки, что хорошо видно на ярком фоне. Анионные красители отталкиваются клетками, поэтому клетки ярко светятся на окрашенном фоне. См. рисунки 1 и 2 для примеров обоих.

Рисунок 1. Отрицательное окрашивание Cyptococcus neoformans , инкапсулированных дрожжей. Рисунок 2. Положительное окрашивание Staphylococcus aureus.

Вероятно, наиболее важным признаком, который становится очевидным при окрашивании бактериальных клеток, является их клеточная морфология (не путать с колониальной морфологией, которая представляет собой появление бактериальных колоний на чашке с агаром). Большинство гетеротрофных и культивируемых бактерий имеют несколько основных форм: сферические клетки (кокки/кокки), палочковидные клетки (бациллы/бациллы) или палочковидные клетки с изгибами или изгибами (вибрионы и спириллы соответственно). Существует большее разнообразие форм среди архей и других бактерий, обитающих в экосистемах, отличных от человеческого тела.

Часто бактерии создают специфические расположения клеток, которые формируются в результате бинарного деления бактериями по мере их размножения. Механизмы особенно очевидны для неподвижных бактерий, потому что клетки имеют тенденцию оставаться вместе после завершения процесса деления. И форма, и расположение клеток являются характеристиками, по которым можно различать бактерии. Наиболее часто встречающиеся формы бактерий (кокки и бациллы) и их возможное расположение показаны на рисунках 3 и 4.

Рисунок 3. Возможное расположение бактериальных клеток кокков. Рисунок 4. Возможное расположение бактериальных клеток для бацилл

Дифференциальные методы окрашивания

В микробиологии методы дифференциального окрашивания используются чаще, чем простое окрашивание, как средство сбора информации о бактериях. Методы дифференциального окрашивания, которые обычно требуют более одного окрашивания и нескольких стадий, называются таковыми, потому что они позволяют дифференцировать типы клеток или клеточные структуры.

Наиболее важным из них является окраска по Граму. Другие методы дифференциального окрашивания включают окрашивание эндоспор (для выявления бактерий, образующих эндоспоры), кислотоустойчивое окрашивание (для различения Mycobacterium из других бактерий), метахроматическое окрашивание для выявления гранул запаса фосфата и окрашивание капсулы (для выявления инкапсулированных бактерий). Мы будем выполнять процедуры окрашивания по Граму и эндоспор в лаборатории и просматривать подготовленные слайды, которые подчеркивают некоторые другие клеточные структуры, присутствующие в некоторых бактериях.

Окрашивание по Граму

Рисунок 5. Бактерии, окрашенные по Граму.

В 1884 году врач Ганс Кристиан Грам изучал этиологию (причину) респираторных заболеваний, таких как пневмония. Он разработал процедуру окрашивания, которая позволила ему идентифицировать бактерию в легочной ткани, взятой у умерших пациентов, как этиологический агент фатальной пневмонии. Хотя метод окрашивания по Граму мало помог в лечении болезни, метод окрашивания по Граму значительно облегчил диагностику причины смерти человека при вскрытии. Сегодня мы используем методы окрашивания по Граму, чтобы облегчить идентификацию бактерий, начиная с предварительной классификации в одну из двух групп: Грамположительные или Грамотрицательные .

Дифференциальный характер окраски по Граму основан на способности некоторых бактериальных клеток сохранять первичную окраску (кристаллический фиолетовый), сопротивляясь процессу обесцвечивания. Окрашивание по Граму включает четыре этапа. Сначала клетки окрашивают кристаллическим фиолетовым, а затем добавляют закрепитель красителя (йод). Затем применяется спирт, который избирательно удаляет окраску только с грамотрицательных клеток. Наконец, добавляется вторичный краситель, сафранин, который контрастно окрашивает обесцвеченные клетки в розовый цвет.

Хотя Грам в то время этого не знал, основное различие между этими двумя типами бактериальных клеток заключается в их клеточных стенках. Стенки грамотрицательных клеток имеют внешнюю мембрану (также называемую оболочкой), которая растворяется во время промывки спиртом. Это позволяет кристаллическому фиолетовому красителю уйти. Только обесцвеченные клетки поглощают розовый краситель сафранин, что объясняет разницу в цвете между двумя типами клеток. По завершении процедуры окрашивания по Граму грамположительные клетки становятся фиолетовыми, а грамотрицательные — розовыми.

При интерпретации окрашенного по Граму мазка необходимо также описать морфологию (форму) клеток и их расположение. На рисунке 5 представлены два различных типа бактерий, которые можно различить по реакции окрашивания по Граму, а также по их форме и расположению. Ниже опишите эти характеристики для обеих бактерий:

	Грамположительные бактерии:	Грамотрицательная бактерия:
Морфология
Расположение

Кислотостойкий краситель

Некоторые бактерии производят воскообразную субстанцию ​​ миколовую кислотную , когда они строят свои клеточные стенки.

Миколевая кислота действует как барьер, защищая клетки от обезвоживания, а также от фагоцитоза клетками иммунной системы хозяина. Этот восковой барьер также предотвращает проникновение красителей в клетку, поэтому окрашивание по Граму не работает с микобактериями, такими как Mycobacterium , которые являются патогенами человека и животных. Для этих бактерий используется метод кислотного – быстрого окрашивания .

Рисунок 6. Кислотоустойчивые палочки в мокроте

Для выполнения кислотостойкой окраски термофиксированный мазок заливают первичным красителем карбол-фуксин, а предметное стекло нагревают на водяной бане с водяным паром. Тепло «плавит» восковую клеточную стенку и позволяет клеткам поглощать краситель. Затем предметному стеклу дают остыть и добавляют раствор кислоты и спирта в качестве обесцвечивателя. Клетки, которые являются «кислотостойкими» из-за миколовой кислоты в их клеточной стенке, сопротивляются обесцвечиванию и сохраняют первичное окрашивание. Все остальные типы клеток будут обесцвечены. Затем в качестве контрастного красителя используется метиленовый синий. В конце концов, кислотоустойчивые бактерии (КУБ) будут окрашены в ярко-розовый цвет, а все остальные типы клеток будут казаться голубыми.

Методы окрашивания для выделения специфических клеточных структур

Капсула : Полисахаридная слизь, которая окружает некоторые виды бактерий и несколько типов эукариотических микробов, лучше всего визуализируется при отрицательном окрашивании клеток. В этом методе бактерии сначала смешивают с красителем, а затем каплю смеси распределяют по поверхности предметного стекла тонкой пленкой. При использовании этого метода капсулы выглядят как прозрачный слой вокруг бактериальных клеток с темным фоном.

Метахроматические гранулы или прочие внутрицитоплазматические тела : Некоторые бактерии могут содержать запасающие тела, которые можно окрашивать. Одним из примеров является грамположительная бацилла Corynebacterium , которая хранит фосфат в структурах, называемых «волютин» или метахроматических гранулах, которые находятся внутри клеточной мембраны. Различные методы окрашивания используются для визуализации внутрицитоплазматических телец у бактерий, которые часто дают ключ к идентификации при наблюдении в клетках.

Окрашивание эндоспор

Эндоспоры — это спящие формы живых бактерий, и их не следует путать с репродуктивными спорами, вырабатываемыми грибами. Эти структуры производятся несколькими родами грамположительных бактерий, почти всеми бациллами, в ответ на неблагоприятные условия окружающей среды. Двумя распространенными бактериями, которые производят эндоспоры, являются Bacillus или Clostridum . Оба живут в основном в почве и как симбионты растений и животных и производят эндоспоры, чтобы выжить в среде, которая быстро и часто меняется.

Процесс эндоспоруляции (образование эндоспор) включает несколько стадий. После того, как бактериальная клетка реплицирует свою ДНК, образуются слои пептидогликана и белка, окружающие генетический материал. После полного формирования эндоспора высвобождается из клетки и может находиться в состоянии покоя в течение нескольких дней, недель или лет. Когда преобладают более благоприятные условия окружающей среды, эндоспоры прорастают и возвращаются к активной деятельности в качестве вегетативных клеток.

Зрелые эндоспоры обладают высокой устойчивостью к условиям окружающей среды, таким как тепло и химические вещества, что позволяет бактериям выживать в течение очень длительного периода времени. Эндоспоры, образовавшиеся миллионы лет назад, были успешно возвращены к жизни, просто обеспечив их водой и пищей.

Поскольку оболочка эндоспор очень устойчива к окрашиванию, был разработан специальный метод, чтобы их было легче увидеть в светлопольном микроскопе. Этот метод, называемый окрашиванием эндоспор , использует либо тепло, либо длительное время воздействия, чтобы побудить эндоспоры принять первичное окрашивание, обычно водорастворимый краситель, такой как малахитовый зеленый, поскольку эндоспоры проницаемы для воды. После этапа обесцвечивания, при котором краситель удаляется из вегетативных клеток в мазке, применяется контрастное окрашивание сафранином для придания цвета и контраста. При окрашивании этим методом эндоспоры становятся зелеными, а вегетативные клетки окрашиваются в розовый цвет, как показано на рис. 7.9.0005 Рисунок 7. Бактериальные клетки с эндоспорами, окрашенные красителем для эндоспор. Рисунок 8. Бациллы с эндоспорами при фазово-контрастной микроскопии.

Хотя сами эндоспоры устойчивы к окрашиванию по Граму, бактериальные клетки, захваченные в процессе создания этих структур, могут быть окрашены. В этом случае эндоспоры видны как четкие овальные или сферические участки внутри окрашенной клетки. Эндоспоры также можно непосредственно наблюдать в клетках с помощью фазово-контрастной микроскопии, как показано на рис. 8.9.0005

Поскольку многие методы дифференциального окрашивания требуют нескольких этапов и занимают много времени, мы не будем использовать все описанные выше методы дифференциального окрашивания.

Предварительно окрашенные предметные стекла

будут использоваться для визуализации бактериальных капсул, метахроматических гранул и кислотоустойчивых бацилл. Получите по одному предметному стеклу каждой из трех бактерий, перечисленных в таблице ниже. Просматривая эти слайды, обратите внимание на «выделенные» структуры. Ваш изолят из окружающей среды может иметь одну или несколько из этих клеточных особенностей, и научиться их распознавать поможет в идентификации. Все это следует рассматривать с помощью масляного иммерсионного объектива.

Бактерии	Пятно	Описание или эскиз ячеек с указанным признаком
Flavobacterium capsulatum	Краситель для капсул
Corynebacterium diphtheriae	Метиленовый синий (метахроматические гранулы)
Микобактерии туберкулеза	Кислотостойкий краситель

Окраска по Граму

Все процедуры окрашивания следует проводить над раковиной. Будет продемонстрирована процедура окрашивания по Граму, а обзор представлен в таблице 1.

Доброволец с вашего лабораторного стола должен получить культуры бактерий, которые вы будете использовать в этой лаборатории, в соответствии с указаниями вашего инструктора. Одна из культур будет грамположительной бактерией, а другая — грамотрицательной. Ниже напишите названия бактерий, которые вы будете использовать, вместе с BSL для каждой культуры:

________________________________________________________________________________________________

Возьмите два предметных стекла и приготовьте мазок каждой из двух бактериальных культур, по одной на предметное стекло, как показано на рисунке. Дать ПОЛНОСТЬЮ высохнуть на воздухе и зафиксировать теплом. Оба мазка окрасить по Граму. Рассмотрите слайды с помощью светового микроскопа с увеличением в 1000 раз и запишите свои наблюдения в таблицу ниже.

Название культуры	Реакция окрашивания по Граму	Клеточная морфология	Расположение

Окраска по Граму «Окончательный осмотр»: приготовьте мазок, содержащий смесь грамположительных и грамотрицательных бактерий, добавив небольшое количество каждой бактерии в одну каплю воды на предметном стекле. Нагревание фиксирует мазок и окрашивает его по Граму. Вы должны быть в состоянии определить реакцию окрашивания по Граму, клеточную морфологию и расположение ОБЕИХ бактерий в этом смешанном мазке. Ваш преподаватель может попросить показать этот слайд и предложить конструктивный комментарий.

Окрашивание эндоспор

Лишь несколько родов бактерий продуцируют эндоспоры, и почти все они являются грамположительными бациллами. Наиболее примечательны виды Bacillus и Clostridium , которые естественным образом обитают в почве и являются обычными загрязнителями поверхностей. Рост Clostridium spp. обычно ограничивается анаэробной средой; Bacillus spp. могут расти аэробно и анаэробно. Эндоспорообразующие бактерии отличаются от других групп грамположительных бацилл и отличаются своими эндоспорами.

Обзор процедуры окрашивания эндоспор представлен в таблице 2.

После окрашивания эндоспоры обычно выглядят как светло-зеленые овальные или сферические структуры, которые можно увидеть внутри или снаружи вегетативных клеток, которые кажутся розовыми.

Форма и расположение эндоспор внутри бактериальных клеток, а также то, расширяются ли спорангии (D) или не расширяются (ND) стороны клетки, являются важными характеристиками, которые помогают различать виды (см. рис. 9).).

Рисунок 9

1. Овальный, центральный, не расширенный (ND)
2. Овальный, терминальный, ND (и параспоральный кристалл)
3. Овальный, концевой, расширенный (D)
4. Овал, центральный, D
5. Сферический, концевой, D
6. Овальный, боковой, D

Эндоспоры достаточно устойчивы к большинству процедур окрашивания; однако в обычно окрашенном мазке они могут быть видны как «очертания» с чистым пространством внутри. Если вы наблюдаете «очертания» или то, что кажется «призраками» клеток в окрашенном по Граму мазке грамположительных бацилл, то следует также выполнить окрашивание эндоспор, чтобы подтвердить наличие или отсутствие эндоспор.

Доброволец с вашего лабораторного стола должен получить бактериальные культуры для окрашивания эндоспор в соответствии с указаниями вашего инструктора. Обратите внимание, что все они будут видами Bacillus . Подготовить мазки и окрасить каждый, используя технику окрашивания эндоспор. Рассмотрите слайды и отметьте форму и расположение эндоспоры, а также внешний вид спорангиев (набухшие или не набухшие) в таблице ниже:

Название культуры	Форма эндоспоры	Местоположение	Спорангий

Кроме того, выберите ОДНУ из приведенных выше культур и окрасьте ее по Граму. Запишите свои результаты ниже в отведенных местах:

Наименование культуры, окрашенной по Граму: _________________________________________________________

Реакция окрашивания по Граму и клеточная морфология: ___________________________________________

Видны ли эндоспоры в мазке, окрашенном по Граму? _________________ Если вы видите эндоспоры, опишите, как они выглядят в препарате, окрашенном по Граму, и чем они похожи и отличаются от того, что вы видите в препарате, окрашенном эндоспорами.

 

Комбинированные методы окрашивания для демонстрации биопленки золотистого стафилококка в рутинной гистопатологии

. 2018 февраль 20;3(1):27-36.

дои: 10.7150/jbji.22799. Электронная коллекция 2018.

Луиза Крузе Дженсен ¹ , Николь Линд Хенриксен ¹ , Томас Бьярншолт ^{2 3} , Каспер Норсков Краг ² , Хенрик Эльванг Йенсен ¹

Принадлежности

• ¹ Департамент ветеринарной медицины и зоотехники, Ridebanevej 3, 1870 Frederiksberg C, Университет Копенгагена, Дания.
• ² Центр биопленок Costerton, отделение иммунологии и микробиологии, Blegdamsvej 3B, 2200 Copenhagen N, Копенгагенский университет, Дания.
• ³ Кафедра клинической микробиологии, Джулиан Мариес Вей 22, 2100 Копенгаген Ø, Университетская больница Копенгагена, Дания.

• PMID: 29545993
• PMCID: PMC5852845
• DOI: 10.7150/jbji.22799

Бесплатная статья ЧВК

Луиза Крузе Дженсен и др. J Bone Jt Infect. 2018 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2018 февраль 20;3(1):27-36.

дои: 10.7150/jbji.22799. Электронная коллекция 2018.

Авторы

Луиза Крузе Дженсен ¹ , Николь Линд Хенриксен ¹ , Томас Бьярншолт ^{2 3} , Каспер Норсков Краг ² , Хенрик Эльванг Йенсен ¹

Принадлежности

• ¹ Департамент ветеринарной медицины и зоотехники, Ridebanevej 3, 1870 Frederiksberg C, Университет Копенгагена, Дания.
• ² Центр биопленок Costerton, отделение иммунологии и микробиологии, Blegdamsvej 3B, 2200 Copenhagen N, Копенгагенский университет, Дания.
• ³ Кафедра клинической микробиологии, Джулиан Мариес Вей 22, 2100 Копенгаген Ø, Университетская больница Копенгагена, Дания.

• PMID: 29545993
• PMCID: PMC5852845
• DOI: 10.7150/jbji.22799

Абстрактный

Цель: Визуализация биопленки Staphylococcus aureus с использованием гистохимического окрашивания и комбинированной гистохимии (ГХ) и иммуногистохимии (ИГХ). Методы: Способность S. aureus S54F9 образовывать биопленку была протестирована in vitro . После этого инфицированную костную ткань собирали у двух разных свиных моделей остеомиелита, инокулированных S. aureus , штамм S54F9. Время заражения составило пять и пятнадцать дней соответственно. Двадцать пять различных протоколов гистохимического окрашивания были протестированы, чтобы найти красители, которые могли бы идентифицировать матрикс внеклеточной биопленки. Протоколы с оптимальной визуализацией внеклеточного матрикса биопленки были объединены с иммуногистохимическим протоколом на основе специфического антитела против S. aureus. Комбинированные протоколы были применены к ткани свиных моделей и к инфицированной костной ткани ребенка, страдающего хроническим стафилококковым остеомиелитом более года. Результаты: S. aureus S54F9 показал способность образовывать биопленку in vitro . Визуализация биопленки, т.е. . бактериальные клетки и внеклеточный матрикс разных цветов были видны, когда иммуногистохимический протокол сочетался с Alcian Blue ph4, Luna и метилпирониновым зеленым. Бактериальные клетки были от красных до светло-коричневых, а внеклеточный матрикс был светло-голубым, синим или оранжевым в зависимости от гистохимического окрашивания. В моделях свиньи и человеческом случае 10 и 90 процентов, соответственно, бактериальных агрегатов в поле 100-кратного увеличения отображали как внеклеточный матрикс, так и бактериальные клетки одновременно в двух разных цветах. Выводы: Комбинацию HC и IHC можно использовать для рутинной диагностики и характеристики биопленочных инфекций.

Ключевые слова: биопленка; золотистый стафилококк; костная инфекция; гистология; световая микроскопия.

Заявление о конфликте интересов

w3.org/1998/Math/MathML» xmlns:p1=»http://pubmed.gov/pub-one»> Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Цифры

Рисунок 1

Костная ткань, используемая в…

Рисунок 1

Костная ткань, использованная в настоящем исследовании. A: Свиная модель остеомиелита, связанного с имплантатом…

Рисунок 1

Костная ткань, использованная в настоящем исследовании. A: Свиная модель остеомиелита, связанного с имплантатами. Компьютерная томография через пять дней после прививки демонстрирует полость большеберцового имплантата (ic), используемую для инъекции S. aureus и введения небольшого стального имплантата. B: Гистология изображения A, демонстрирующая бактерии (стрелка) в ткани вокруг имплантата, прилегающей к полости имплантата (ic). ОН. C: Свиная модель гематогенного остеомиелита, умерщвленная через пятнадцать дней после инокуляции. Поражение показано в метафизе правой бедренной кости. D: Гистология изображения C, демонстрирующая бактерии (стрелка) в центре поражения. ОН. Д: Рентгенограмма ребенка с гематогенным остеомиелитом и патологическим переломом правой бедренной кости. F: Гистология изображения E, демонстрирующая бактерии (стрелка) в корковом секвестре. ОН.

Рисунок 2

Образование биопленки in vitro .…

Рисунок 2

Образование биопленки in vitro . A: Прикрепленная биомасса эталонного штамма RN4220 и…

фигура 2

Образование биопленки in vitro . A: Прикрепленная биомасса эталонного штамма RN4220 и S54F9. в лунках микротитровальных планшетов на основе связывания кристаллического фиолетового. Средняя OD ₅₉₄ с SEM. B: 3D-проекция дна микротитра, хорошо окрашенного для бактериальных клеток зеленым Syto9. 630-кратное увеличение.

Рисунок 3

Иммуногистохимический (А), гистохимический (Б-Л) и…

Рисунок 3

Иммуногистохимическое (A), гистохимическое (B-L) и комбинированное гистохимическое/иммуногистохимическое (M-O) окрашивание свиней С.…

Рисунок 3

Иммуногистохимическое (A), гистохимическое (B-L) и комбинированное гистохимическое/иммуногистохимическое (M-O) окрашивание, нанесенное на свиную S. aureus инфицированную костную ткань. A: S. aureus иммуногистохимия, B: Альциановый синий ph4, C: Луна, D: Метиловый зеленый-пиронин, E: Сафранин O, F: Грам, G: Кристаллический фиолетовый, H: Масляный красный, I: Фельген, J : Verhoeff, K: красный альциан, L: трихом Массона, M: синий альциан pH 3 + S. aureus иммуногистохимия, N: Луна + S. aureus иммуногистохимия, O: Метиловый зеленый-пиронин + S. aureus иммуногистохимия. Все фотографии с 60-кратным увеличением

Рисунок 4

Состав и размер биопленки…

Рисунок 4

Состав и размер биопленкообразующих инфекций в костной ткани свиньи и человека…

Рисунок 4

Состав и размер биопленкообразующих инфекций в костной ткани свиней и человека. A: Размер трех самых маленьких и трех самых больших бактериальных агрегатов, наблюдаемых с помощью иммуногистохимии, в направлении S. aureus , среднее значение ± стандартное отклонение. B-D: количество бактериальных агрегатов с видимой внеклеточной биопленочной матрицей и без нее при 100-кратном увеличении после комбинированной гистохимии с иммуногистохимией. По оси x показаны гистохимические пятна. E: Процент бактериальных клеток и внеклеточного матрикса у одного представителя Агрегаты биопленки S. aureus . AB: Alcian Blue ph4, MGP: метилпирониновый зеленый, DPI: дни после заражения, ECM: внеклеточный матрикс.

Рисунок 5

Процентное содержание бактерий и внеклеточных…

Рисунок 5

Процентное содержание бактерий и внеклеточного матрикса в инфекциях, вызванных биопленкой S. aureus . Левая колонка:…

Рисунок 5

Процент бактерий и внеклеточного матрикса при инфекции биопленки S. aureus . Левая колонка: комбинированная иммуногистохимия (в направлении S. aureus ) и окрашивание альциановым синим ph4 репрезентативных бактериальных биопленок (красный контур), демонстрирующих как бактерии (красный/коричневый), так и внеклеточный матрикс (синий). В правом столбце показаны расчеты % бактериальных клеток (желтый) и внеклеточного матрикса (фиолетовый). A+B: Костная ткань от модели свиньи S. aureus остеомиелит, связанный с имплантатом, инфицирован в течение пяти дней. Бар = 40 мкм. C+D: Костная ткань свиной модели гематогенного остеомиелита S. aureus , инфицированная в течение пятнадцати дней. Бар = 78 мкм. E+F: Костная ткань пациента, страдающего гематогенным остеомиелитом S. aureus в течение более одного года. Бар = 72 мкм.

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

Похожие статьи

• Патология и образование биопленки на модели стафилококкового остеомиелита у свиней.

  Йохансен Л.К., Кох Дж., Фрис Д., Аальбек Б., Нильсен О.Л., Лейфссон П.С., Ибург Т.М., Сваластога Э., Бьюлунд Л.Е., Бьярншолт Т., Хёйби Н., Дженсен Х.Э. Йохансен Л. К. и соавт. J Комп Патол. 2012 август-октябрь;147(2-3):343-53. doi: 10.1016/j.jcpa.2012.01.018. Epub 2012 24 апр. J Комп Патол. 2012. PMID: 22534025

• Идентификация белков Staphylococcus aureus, распознаваемых опосредованным антителами иммунным ответом на биопленочную инфекцию.

  Брэди Р.А., Лейд Дж.Г., Кампер А.К., Костертон Дж.В., Ширлифф М.Е. Брэди Р.А. и соавт. Заразить иммун. 2006 г., июнь; 74 (6): 3415-26. doi: 10.1128/IAI.00392-06. Заразить иммун. 2006. PMID: 16714572 Бесплатная статья ЧВК.

• Иммунообнаружение биопленки золотистого стафилококка на кохлеарном импланте.

  Кос М.И., Стенц Л., Франсуа П., Гайо Дж.П., Шренцель Дж. Кос М.И. и соавт. Инфекционное заболевание. 2009 г., октябрь; 37 (5): 450-4. doi: 10.1007/s15010-008-8335-1. Epub 2009 10 марта. Инфекционное заболевание. 2009. PMID: 19280117

• Протеомика матрикса биопленки Staphylococcus aureus в крысиной модели инфекции, связанной с ортопедическими имплантатами.

  Лей М.Г., Гупта Р.К., Ли С.И. Лей М.Г. и соавт. ПЛОС Один. 2017 9 ноя;12(11):e0187981. doi: 10.1371/journal.pone.0187981. Электронная коллекция 2017. ПЛОС Один. 2017. PMID: 29121106 Бесплатная статья ЧВК.

• Матрицы биопленок на белковой основе у стафилококков.

  Speziale P, Pietrocola G, Foster TJ, Geoghegan JA. Специале П. и др. Front Cell Infect Microbiol. 2014 10 декабря; 4:171. doi: 10.3389/fcimb. 2014.00171. Электронная коллекция 2014. Front Cell Infect Microbiol. 2014. PMID: 25540773 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Синтез цианобактериального галометаболита хлоросферолактилата В и демонстрация его противомикробного действия in vitro и in vivo .

  Дженсен Н., Дженсен Х.Е., Аальбек Б., Блируп-Плум С.А., Сото С.М., Сепас В., Лопес Ю., Габаса Ю., Гутьеррес-Дель-Рио И., Вильяр С.Дж., Ломбо Ф., Иглесиас М.Дж., Соэнгас Р., Лопес Ортис Ф. , Дженсен ЛК. Дженсен Н. и др. Фронт микробиол. 2022 сен 29;13:950855. doi: 10.3389/fmicb.2022.950855. Электронная коллекция 2022. Фронт микробиол. 2022. PMID: 36246241 Бесплатная статья ЧВК.

• CCL2, секретируемый мезенхимальными стромальными клетками, способствует механизмам антибактериальной защиты за счет повышенной экспрессии антимикробного пептида в кератиноцитах.

  Маркс С., Гарднер С., Харман Р.М., Вагнер Б., Ван де Валле Г.Р. Маркс С. и др. Стволовые клетки Transl Med. 2021 Дек;10(12):1666-1679. doi: 10.1002/sctm.21-0058. Epub 2021 16 сентября. Стволовые клетки Transl Med. 2021. PMID: 34528765 Бесплатная статья ЧВК.

• Образование микробной биопленки на коже как основная причина синдрома красной мошонки.

  Перри Т.В. Перри ТВ. Евр J Med Res. 2021 авг 19; 26 (1): 95. doi: 10.1186/s40001-021-00569-9. Евр J Med Res. 2021. PMID: 34412706 Бесплатная статья ЧВК.

• Патологическое и микробиологическое воздействие биокомпозита с гентамицином после ограниченной или обширной хирургической обработки в модели остеомиелита у свиней.

  Blirup-Plum SA, Bjarnsholt T, Jensen HE, Kragh KN, Aalbæk B, Gottlieb H, Bue M, Jensen LK. Блируп-Плюм С.А. и др. Кость Сустав Res. 2020 31 июля; 9 (7): 394-401. doi: 10.1302/2046-3758.97.BJR-2020-0007.R1. электронная коллекция 2020 июль. Кость Сустав Res. 2020. PMID: 32793334 Бесплатная статья ЧВК.

• Модель In Vitro неприкрепленных биопленкоподобных бактериальных агрегатов на основе магнитной левитации.

  Домнин П., Архипова А., Петров С., Сысолятина Е., Парфенов В., Каралкин П., Мухачев А., Гусаров А., Моисенович М., Хесуани Ю., Ермолаева С. Домнин П. и др. Appl Environ Microbiol. 1 сентября 2020 г .; 86 (18): e01074-20. doi: 10.1128/АЕМ.01074-20. Печать 2020 1 сентября. Appl Environ Microbiol. 2020. PMID: 32680859Бесплатная статья ЧВК.

Рекомендации

1. 1. Костертон Дж. В., Гизи Г.Г., Ченг К.Дж. Как прилипают бактерии. наук Ам. 1978; 238: 86–95. — пабмед
2. 1. Донлан Р.М., Костертон В.Дж. Биопленки: механизмы выживания клинически значимых микроорганизмов. Clin Microbiol Rev. 2002; 15:167–193. — ЧВК — пабмед
3. 1. Бьярншолт Т. Роль бактериальных биопленок при хронических инфекциях.